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　　蛋白質(zhì)分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸，使蛋白質(zhì)對(duì)280nm的光波具有吸收值，在一定的范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)溶液的吸光值與其濃度成正比，可作定量測(cè)定。該法操作簡(jiǎn)單、快捷，并且測(cè)定的樣品可以回收，低濃度鹽類不干擾測(cè)定結(jié)果，故在蛋白質(zhì)和酶的生化制備中廣泛被采用。但此方法存在以下缺點(diǎn)：
 

　　1.當(dāng)待測(cè)的蛋白質(zhì)中酪氨酸和色氨酸殘基含量差別較大會(huì)產(chǎn)生一定的誤差，故該法適用于測(cè)定與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)氨基酸組成相似的樣品。
 

　　2.若樣品中含有其他在280nm吸收的物質(zhì)如核酸等化合物，就會(huì)出現(xiàn)較大的干擾。但核酸的吸收高峰在260nm，因此分別測(cè)定280nm和260nm兩處的光吸收值，通過(guò)計(jì)算可以適當(dāng)?shù)南怂釋?duì)于測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的干擾作用。但因?yàn)椴煌牡鞍踪|(zhì)和核酸的紫外吸收是不同的，雖經(jīng)校正，測(cè)定結(jié)果還存在著一定的誤差。